摘要

       对于许多食品，人们需要获悉其中蛋白质的含量，但是直接测定蛋白质的含量比较困难，通常通过测定氮原子的含量来间接推算其中蛋白质的含量。三聚氰胺（含氮量66%)与蛋白质（平均含氮量16%）相比含有更高比例的氮原子，因此被一些造假者利用，添加在食品中以造成食品蛋白质含量较高的假象。继2008年9月国内发生三鹿奶粉三聚氰胺事件后，伊利雪糕、大白兔奶糖、亨氏米粉、立顿奶茶等奶制品也相继被检测出含有三聚氰胺，严重损害了国内消费者的利益。

　　本文参考国标GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中的样品提取纯化过程，采用反相离子对色谱法测定冰淇淋中三聚氰胺含量，重现性好，灵敏度高。　　

仪器概况
仪器装置
　　本实验使用岛津Prominence LC-20A有效液相色谱仪系统。具体配置为LC-20AD输液泵，DGU-20A3在线脱气机，SIL-20A自动进样器，CTO-20AC柱温箱，SPD-20A紫外可见检测器，CBM-20A控制器和LCsolution色谱工作站。
分析方法
色谱柱：Shimadzu VP-ODS 4.6×250 mm 5um
检测波长：240 nm
流动相：缓冲液：乙腈=90：10
（缓冲液配制方法：准确称取2.10 g 柠檬酸和2.16 g 辛烷磺酸钠，加入约980 mL 水溶解，调节pH 至3.0 后，定容至1L 备用）
流速：1 mL/min
柱温：40℃
进样量：20 μl
洗脱方式：等度洗脱。
样品前处理方法
　　参考国标GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中的样品提取纯化过程，具体步骤如图1所示。

图1 前处理步骤 

分析结果
1.保留时间与峰形

图2为本方法检测三聚氰胺标样的典型色谱图（样品浓度为0.8 ug/mL）

图2 三聚氰胺标样图谱

由图2可见，本方法所测三聚氰胺保留时间为24.40min，峰形尖锐，对称性好。

2.标准曲线

　　用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.8、2、20、40、80 μg/mL 的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程(见图3)。

图3 校准曲线

结果表明，该方法线性良好，相关系数为0.9999。

3.实际样品分析结果

　　按本方法测定两份冰淇淋样品(空白样品和阳性样品)，得到的图谱分别如图4和图5所示，空白样品在三聚氰胺出峰处无基质干扰。经计算，阳性样品中三聚氰胺的含量为1.40 mg/kg。

图5 阳性样品检测结果

结论
　　本方法具有仪器成本低，灵敏度高等优点，适用于冰淇淋中三聚氰胺含量的准确测定。